Опыт клинико-лабораторного испытания медизделий для диагностики in vitro – экспресс-тестов на наркотические средства и психотропные вещества
Куржикбаев Данияр Бахытжанович - врач-психиатр нарколог, руководитель статистического кабинета филиала РГП на ПХВ «Республиканский научно-практический центр психического здоровья» МЗ РК в г. Павлодар
Садвакасова Гульмира Амиргалиевна – руководитель информационно-аналитический мониторинговый центр, РГП на ПХВ «Республиканский научно-практический центр психического здоровья» МЗ РК.
Введение
В настоящее время в республике достаточно активно обсуждается проблема диагностики фактов употребления наркотических средств и психотропных веществ, особенно когда специалист не видит клинических признаков состояния опьянения.
Согласно Правилам проведения медицинского освидетельствования для установления факта употребления психоактивного вещества и состояния опьянения, утвержденных приказом Министра здравоохранения Республики Казахстан от 25 ноября 2020 года № ҚР ДСМ-203/2020, в ряде случаев, таких как невозможность полного освидетельствования в связи с тяжестью состояния освидетельствуемого, наличии сомнений медицинского работника в комплексной оценке состояния опьянения (психических, поведенческих, вегетативных и соматоневрологических расстройств), несогласия освидетельствуемого с результатами освидетельствования и т.д., обязательным является проведение лабораторного исследования или экспресс-тестирования биологических сред (кровь или моча при подозрении на алкогольное опьянение, моча при подозрении на наркотическое или токсикоманическое опьянение). Особенно актуальным это становится в виду того, что в последнее время все больше граждан стремятся оспорить результаты медицинского освидетельствования в судебном порядке.
Лабораторное выявление наркотических и других психоактивных веществ в биологических средах часто требуют предварительного качественного скрининга для выявления искомых веществ до подтверждения контрольных количественных анализов.
В настоящее время в практику внедрены наборы индикаторных полосок, основой действия которых является иммунохроматографический анализ. Анализируемый образец (моча) абсорбируется поглощающими участками полосок, и при наличии в образце наркотика (или его метаболитов) они вступают в реакцию со специфическими антителами, образуя комплекс «антиген – антитело». В зависимости от того, чем метится антитело и какие предусмотрены цветовые реакции, связанные с появлением комплекса «антиген – антитело», индикаторная зона при наличии искомого наркотического вещества приобретает или, наоборот, не приобретает, определённую окраску. Методика применения индикаторных полосок для определения наркотических веществ в биологических жидкостях описана в инструкции, прилагаемой к набору полосок. Там же может приводиться контрольная шкала для оценки положительных и отрицательных реакций. Реализованный в индикаторных полосках метод иммунохроматографического анализа обладает достаточной специфичностью.
В заключении хочется отметить, что иммунохроматографические (ИХА) тесты благодаря быстроте проведения анализа и простоте использования, а также высокой достоверности зарекомендовали себя как эффективное средство выявления факта употребления наркотиков. Они имеют относительно низкую стоимость анализа, высокую достоверность результата, которая приближается к 99,9% (ложноположительные результаты зачастую объясняются тем, что тестируемый принимал определенные лекарственные препараты, которые зачастую имеют общие элементы в своих составах с наркотиками), просты в использования (для проведения анализа требуется совершить всего два простых действия), и имеют значительную скорость получения результата (2-5 минут).
Цель исследования: получение результатов клинических испытаний медицинских изделий для диагностики in vitro на морфин (MOP), трамадол (TRA), мефедрон (MEP), синтетический каннабиноид (К2), барбитураты (BAR), 3,4-метилэнедиоксиметамфетамин (МDМА), бензодиазепины (BZO), марихуана (THC), метилендиоксипировалерон (MDPV), 4-метилэткатинон (MEC).
Задачи исследования: подтвердить или опровергнуть заявленные производителем клиническую безопасность и эффективность медицинских изделий для диагностики in vitro на морфин (MOP), трамадол (TRA), мефедрон (MEP), синтетический каннабиноид (К2), барбитураты (BAR), 3,4-метилэнедиоксиметамфетамин (МDМА), бензодиазепины (BZO), марихуана (THC), метилендиоксипировалерон (MDPV), 4-метилэткатинон (MEC).
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Исследование было проведено на базе филиала РГП на ПХВ «Республиканский научно-практический центр психического здоровья» Министерства здравоохранения Республики Казахстан (РНПЦПЗ), в лабораторно-диагностическом кабинете.
Дизайн исследования включал группу пациентов из 20 человек, у которых производился забор образцов биологической жидкости (моча), общим количеством проб для испытаний 20 образцов.
Выборка исследования была представлена пациентами филиала Республиканского научно-практического центра психического здоровья, добровольно обратившихся за медицинской помощью.
С информированного согласия пациентов, в момент госпитализации пациентам проводилось экспресс-тестирование биологических сред (мочи) на наличие психоактивных веществ, с проведением предтестового и послетестового консультирования специалистов РНПЦПЗ.
Биологический материал (моча), собираемый в лабораторно-диагностическом кабинете, использовался для экспресс-тестирования двумя видами медицинских изделий для диагностики in vitro на: морфин (MOP), трамадол (TRA), мефедрон (MEP), синтетический каннабиноид (К2), барбитураты (BAR), 3,4-метилэнедиоксиметамфетамин (МDМА), бензодиазепины (BZO), марихуана (THC), метилендиоксипировалерон (MDPV), 4-метилэткатинон (MEC) – местного производителя «КазМедТест» (исследуемый тест) и, используемый в клинике РНПЦПЗ, экспресс тест-панель RightSign (контрольный тест).
В заключении полученные результаты экспресс-тестирования исследуемым тестом сравнивались с полученными результатами контрольных тестов, используемых в РНПЦПЗ.
Результаты интерпретировались как подтверждение или опровержение заявленных производителем клинической безопасности и эффективности тестируемых медицинских изделий.
В исследовании использовались следующие методы:
1) Хроматографический скрининговый тест в моче без применения дополнительного оборудования in vitro с помощью экспресс теста-панели на определение наркотиков;
2) Статистические/аналитические методы.
Всем участникам исследования сообщалось, что результаты тестирования будут использованы только с научной целью, а также не имеют юридической силы. Все участники исследования были проинформирован о целях и задачах исследования, ознакомлены с правилами проведения исследования и дали информированное согласие.
Среди отобранных для исследования участников были получены образцы мочи в качестве источника для тестирования. В процессе исследования были соблюдены следующие условия: температура воздуха 20-24°С; относительная влажность 48-60%; тест хранился в его оригинальной упаковке в запечатанном виде при комнатной температуре.
Для анализа были использованы только прозрачные образцы, биологическая жидкость (моча) собиралась в чистую, сухую пластиковую посуду без консервантов. Тесты, образцы мочи и/или контроль должны были иметь одинаковую комнатную температуру перед анализом.
Исследователи проводилось путем хроматографического скринингового теста в моче без применения дополнительного оборудования in vitro с помощью экспресс теста-панели казахстанского производителя. Перед проведением исследования медицинский работник осуществлял идентификацию лица, ознакомившись с его документами, удостоверяющими личность. Характер и последовательность проведения биологических проб определял врач нарколог, в зависимости от особенностей клинического состояния пациента.
Результаты скрининговых тестов с их интерпретацией сразу же сообщались пациенту, и были занесены в электронную историю болезни.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Группа исследования (n=20) была представлена в основном лицами мужского пола – 100%; средний возраст 35,6 лет; пациенты, которые прибыли на добровольное лечение в клинику филиала РНПЦПЗ. 10 пациентов (50 %) – пациенты с Психическими поведенческими расстройствами, вызванными употреблением опиоидов, 10 пациентов (50 %) – с зависимостью от стимуляторов.
Среди обследованных пациентов 5 пациентов при госпитализации показали положительный тест на наркотики экспресс - тест-панелью, и 15 – отрицательно.
Положительные тесты по видам психоактивных веществ (ПАВ) распределились следующем образом: большинство выявленных ПАВ относились к группе опиоидов (морфий 2 положительных теста, трамадол – 2 теста), на синтетический каннабиноид – 1 тест.
5 тестов имели положительный результат только на один вид ПАВ, на два вида ПАВ и более результата не было.
|
Тест |
MOP |
THC |
TRА |
EDDP |
BZО |
MDPV |
К2 |
|
Контрольный тест |
2 |
0 |
2 |
0 |
0 |
0 |
0 |
|
Исследуемый тест |
2 |
0 |
2 |
0 |
0 |
0 |
1 |
Анализ на морфий, трамадол, хроматографическими скрининговыми тестами в биологических средах (моча) RightSign и казахстанского производителя «КазМедТест» показал 100% совпадение. При определении синтетический каннабиноид (К2) тестом RightSign определен не был.
При этом результаты проведённых экспресс-тестов на наличие психоактивных веществ (ПАВ) соответствовали клинической оценке, выполненной врачом-наркологом, что указывало на высокую диагностическую ценность экспресс-тестов, подтверждая их надежность и воспроизводимость в клинических условиях.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Состояние опьянения, возникающее вследствие острой интоксикации психоактивным веществом, характеризующееся сложным комплексом психических, поведенческих, вегетативных и соматоневрологических расстройств, требует комплексного исследования для его оценки с учетом клинических данных, а при необходимости - лабораторных показателей. При невозможности полного освидетельствования оценку возможно провести путем Экспресс-тестирования - хроматографическим скрининговым тестом биологических сред (моча) при подозрении на алкогольное, наркотическое или токсикоманическое опьянение. В связи с этим, расширение арсенала клинически безопасных и эффективных медицинских изделий для хроматографических скрининговых тестов в практической наркологии окажут положительное влияние на качество установления факта употребления психоактивного вещества и состояния опьянения.
Тест на наркотики - это технический анализ, направленный на обнаружение определённых наркотиков или их метаболитов в биологическом образце (моче, крови, слюне). Тест проводится с целью обнаружения фактов использования запрещённых наркотических препаратов и средств. Широко используется набор иммунохроматографических тестов мочи в виде тест-полосок на группы веществ, например мультитест на 3 или на 5 видов (опиаты, марихуана, амфетамин; метамфетамин, кокаин), либо набор из тестов на десять классов веществ (так называемый «10-panel urine screen»). Самый распространённый способ в РК метод — определения на образцах мочи тест-полосками.
Этот хроматографический скрининговый тест осуществляется без применения дополнительного оборудования. В тесте используются моноклональные антитела для селективного определения повышенного уровня наркотиков в моче.
Во время тестирования образец мочи мигрирует вверх по пластинкам по капиллярным каналам. При присутствии наркотика в моче в количестве, не превышающем его пороговую концентрацию, он не будет насыщать антитела, которые нанесены на пластинку. Нанесенные на пластинку антитела в таком случае будут связываться с иммобилизированным конъюгатом наркотика, и в тестовой зоне пластинки проявится цветная полоса. Цветная полоса в тестовой зоне не проявится в случае, если уровень наркотика в моче будет выше пороговой концентрации из-за того, что он свяжется с соответствующими антителами.
Если в образце мочи содержится наркотик, то цветной полосы в тестовой зоне не образуется из-за конкурентного связывания, а при отсутствии наркотика в моче или содержании его в концентрации менее пороговой, цветная полоса будет проявляться. Для контроля процедуры тестирования в контрольной зоне всегда должна проявляться цветная полоса, указывающая на то, что надлежащее количество мочи было нанесено на пластинку.
Экспресс-тест предназначен для in vitro диагностики одноэтапного быстрого качественного определения наркотических соединений в биологических жидкостях организма человека (моче) в клинической практике, а также для самоконтроля.
Определение основано на принципе иммуно-хроматографического анализа, при котором наркотик, находящийся в анализируемом образце, конкурирует с наркотиком, иммобилизованным на нитроцеллюлозной мембране полоски, за возможность связывания с антителами, препятствуя образованию линии розово-фиолетового цвета в нижней части тестовой зоны (тест).
Остальные реагенты обеспечивают образование линии розово-фиолетового цвета (контроль) в верхней части тестовой зоны независимо от присутствия наркотика в образце, что подтверждает правильность проведения процедуры определения. Если концентрация наркотика в образце выше или равна пороговой, то в тестовой зоне образуется одна линия розово-фиолетового цвета, а если наркотик отсутствует или его концентрация ниже порогового уровня – две линии.
Представленное исследование показывает, что использованные экспресс-тестов для диагностики одноэтапного быстрого качественного определения наркотических соединений в биологических жидкостях организма человека (моче) имеет практическую ценность в клинической работе врача нарколога.
Ложноположительные и ложноотрицательные результаты - это частые проблемы в диагностике на употребление ПАВ. Ложноположительный результат происходит, когда тест указывает на наличие ПАВ, хотя их в действительности нет. Это может произойти из-за перекрестных реакций с другими веществами, например, некоторыми лекарственными препаратами или пищевыми добавками, которые могут имитировать химические структуры наркотических веществ.
Ложноотрицательный результат, напротив, указывает на отсутствие ПАВ, когда они фактически присутствуют в организме. Это может происходить, если концентрация ПАВ ниже порогового уровня теста или если образец был неправильно обработан, что повлияло на точность результата.
Если экспресс-тест на ПАВ демонстрирует высокую точность и надежность, то вероятность ложноположительных и ложноотрицательных результатов значительно снижается.
Отсутствие таких ошибок в исследуемых тестах подчеркивает их надежность, что крайне важно для точной диагностики и исключения последствий неправильных выводов в рамках правоприменения и медицинских обследований.
